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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠膀胱成纖維細(xì)胞 人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 LIN54蛋白抗體 小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞 MARCKS樣蛋白1抗體 小鼠骨骼肌細(xì)胞 KIAA1543蛋白抗體 幼蚊細(xì)胞;C6/36

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:959

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

骨

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細(xì)胞樣

YS-01X8230

細(xì)胞簡介:

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮分離自骨組織;股骨頭(caput femoris)呈圓形,約占一圓球的2/3,其上為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋,在其頂部微后有一小窩,稱為股骨頭凹,為股骨頭韌帶附著處,股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀,后毛細(xì)血管微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞;骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯,與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切,參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。

方法簡介:

實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮采用混合膠原酶消化制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,細(xì)胞純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳1-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良

消化液:0.25%,Accutase

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠蛋白激酶A(PKA)試劑盒   96T/48T

小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)試劑盒   96T/48T

小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒   96T/48T

小鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒   96T/48T

小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human breast cancer susceptibility protein 1 (BFAA-1) ELISA Kit 人癌易感蛋白1(BFAA-1)試劑盒

HumandysophinELISAKit 人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cenolandcenosomeaibody,ACA試劑盒人抗中性粒/中心體抗體(ACA)試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物還原型(GSH)濃度比色法定量試劑盒50次

Humanα-Actinin3,ACTN-3ELISAKit人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒規(guī)格:96T/48T

巴豆酰組蛋白H2B重組兔單克隆抗體

酪激酶B單克隆抗體

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白

C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重組產(chǎn)氣莢膜梭菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4)

EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

C. PERFRINGENS NA Protein C.perfringens 重組產(chǎn)氣莢膜梭菌 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠白細(xì)胞介素2(IL-2)試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit

Mouse macrophage inflammatory protein 2 (MIP-2) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白2(MIP-2)試劑盒

Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit人不透光相關(guān)蛋白

同位素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒20次

sAIL大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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