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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
大鼠骨外膜細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
大鼠骨外膜細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：GR6蛋白抗體 磷酸化KB抑制蛋白β抗體 E3泛素連接酶蛋白NEURL1B抗體 大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 GL-261+luc小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤熒光素酶標(biāo)記 C643 (人甲狀腺癌細(xì)胞)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問(wèn)量：335
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
大鼠骨外膜細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
骨組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7632 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠骨外膜分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細(xì)胞，稱為成骨細(xì)胞，這種細(xì)胞具有使骨骼生長(zhǎng)的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞，稱為破骨細(xì)胞。這兩種細(xì)胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細(xì)胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細(xì)胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu)，并且還負(fù)責(zé)拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學(xué)的需要。正常情況下，兩種細(xì)胞之間處于動(dòng)態(tài)的平衡之中，完成骨的生長(zhǎng)發(fā)育的新陳代謝。骨折之后，成骨細(xì)胞首先啟動(dòng)，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復(fù)了骨的連續(xù)性，往往不符合生物力學(xué)的需要，改建塑形的過(guò)程則必須有破骨細(xì)胞的參與才能完成。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨外膜采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨外膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
質(zhì)粒大量提取試劑盒（非柱式法） 5T
QSPlasmidMaxiKit 10T
血液(溶液型） 10ml（血量）
Relax-ISOBloodDNAKitI 50ml（血量）
豬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒
Human ai murine typhus aibody (ai-typhus-Ab) ELISA Kit 人抗斑疹傷寒抗體(ai-typhus-Ab)試劑盒
Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit 豬白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAgIa(HumanangiotensinIIreceptoypeIa)ELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型
血液牛病毒性腹瀉病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性試劑盒20次
MouseypsinELISAKit小鼠(ypsin)試劑盒
AF680標(biāo)記的腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體
二?；视王；D(zhuǎn)移酶2樣蛋白3抗體
VCAM1重組人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
雄激素受體(AR)重組蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)
IL23重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AGT Protein Human 重組人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 標(biāo)簽)
雄激素受體(AR)重組蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)
AGT Protein Human 重組人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 標(biāo)簽)
VCAM1重組人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 標(biāo)簽)
IL23重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
大鼠骨外膜細(xì)胞小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA 試劑盒
Rat ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒
HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-Ab試劑盒人抗BP180抗體(BP180-Ab)試劑盒
植物核糖體分離試劑盒10次
Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
